دوره 12، شماره 2 - ( علوم پیراپزشکی و بهداشت نظامی (تابستان 1396) 1396 )                   جلد 12 شماره 2 صفحات 13-20 | برگشت به فهرست نسخه ها

XML English Abstract Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

soheily Z, Soleimani M, Majidzadeh K. A PCR Assay for Detection of Mycoplasma Contamination in Cell Culture by 16S rRNA Specific Primers. Paramedical Sciences and Military Health. 2017; 12 (2) :13-20
URL: http://jps.ajaums.ac.ir/article-1-103-fa.html
سهیلی زهره، سلیمانی محمد، مجیدزاده کیوان. شناسایی آلودگی مایکوپلاسمایی در کشتهای سلولی به روش PCRبا استفاده از پرایمرهای اختصاصی 16S rRNA. علوم پیراپزشکی و بهداشت نظامی. 1396; 12 (2) :13-20

URL: http://jps.ajaums.ac.ir/article-1-103-fa.html


1- گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد قم، قم، ایران
2- گروه میکروب شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی آجا، تهران، ایران ، soleimanidor@yahoo.com
3- مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی تسنیم، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی آجا، تهران، ایران
چکیده:   (1111 مشاهده)

مقدمه: مایکوپلاسماها از مهمترین و جدی ترین آلوده کننده های کشت های سلولی و فرآورده های بیولوژیک تولیدی در کشت های سلولی می باشد. تشخیص مایکوپلاسماها بر پایه کشت و روش های مولکولی می باشد. این روش ها از نظر سرعت، اطمینان، ویژگی و حساسیت با یکدیگر متفاوت هستند. هدف اصلی این مطالعه ردیابی آلودگی های مایکوپلاسمایی در نمونه های کشت با استفاده از پرایمرهای اختصاصی 16S rRNA براساس تکنیک PCR می باشد.

مواد و روشها: توالی ژن 16S rRNA گونه های مایکوپلاسمای آلوده کننده کشت های سلولی از بانک ژن استخراج و هم ردیف سازی گردید. پرایمرهای اختصاصی با استفاده از ترادف های بدست آمده، طراحی شد. برای ساخت کنترل مثبت، توالی ژن 16S rRNA به روش PCR تکثیر و سپس در وکتور پلاسمیدی کلون شد.

نتایج: الکتروفورز محصول PCR ژن 16S rRNA مطابق انتظار باندی به طول219 bp  را بر روی ژل آگاروز نشان داد. این الگو در نمونه های کنترل منفی دیده نشد. همچنین تکثیر قطعه ای به همین اندازه در پلاسمید نوترکیب حاصل، صحت کلونینگ را تایید کرد.

بحث و نتیجه گیری: این روش با داشتن مزیت هایی مانند سرعت بالا و دقت زیاد از پتانسیل مناسبی برای استفاده در آزمایشگاه های کشت سلول برخوردار است.

متن کامل [PDF 821 kb]   (453 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: مقالات کامل
دریافت: ۱۳۹۶/۳/۲۴ | پذیرش: ۱۳۹۶/۵/۸ | انتشار: ۱۳۹۶/۶/۳۰

ارسال نظر درباره این مقاله : نام کاربری یا پست الکترونیک شما:
CAPTCHA code

ارسال پیام به نویسنده مسئول


کلیه حقوق این وب سایت متعلق به علوم پیراپزشکی و بهداشت نظامی می باشد.

© 2015 All Rights Reserved | Paramedical Sciences and Military Health